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超微量分光光度計的蛋白質(zhì)直接定量
日期：2025-01-23 04:57
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摘要：
這種方法是在280nm波長顯示，直接測試蛋白。選擇Warburg 公式，超微量分光光度計可以直接顯示出樣品的濃度還不大，或者是選擇相應(yīng)的換算方法最為突出，將吸光值轉(zhuǎn)換為樣品濃度方案。蛋白質(zhì)測定過程非常簡單技術創新，先測試空白液邁出了重要的一步，然后直接測試蛋白質(zhì)。由于緩沖液中存在一些雜質(zhì)設施，一般要消除320nm 的“背景”信息，設(shè)定此功能“開”堅定不移。與測試核酸類似組合運用，要求A280的吸光值至少大于0.1A，*佳的線性范圍在1.0-1.5 之間迎難而上。實驗中選擇Warburg 公式顯示樣品濃度時積極，發(fā)現(xiàn)讀數(shù)“漂移”探索。這是一個正常的現(xiàn)象。事實上產業，只要觀察A280的吸光值的變化范圍不超過1%滿意度，表明結(jié)果非常穩(wěn)定。漂移的原因是因為Warburg 公式吸光值換算成濃度可持續，乘以一定的系數(shù)模樣，只要吸光值有少許改變，濃度就會被放大服務，從而顯得結(jié)果很不穩(wěn)定很重要。蛋白質(zhì)直接定量方法，適合測試較純凈覆蓋、成分相對單一的蛋白質(zhì)異常狀況。紫外直接定量法相對于比色法來說，速度快高效，操作簡單應用創新；但是容易受到平行物質(zhì)的干擾，如DNA的干擾機構；另外敏感度低的特性，要求蛋白的濃度較高。